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Cre Exam English, McColl, Suite 207 McAllen, TX 78502 Phone: 956. 19 y 20 Nuevo Laredo, Mexico 88260 Phone: +52. 4799 San Antonio Office: 401 E. , Frontiers in microbiology, 2023. 268. 580. 0029 flox是Cre的靶序列,会被Cre识别并介导基因重组(倒位或切除),这里应该是让目的基因不表达。 Cre/+:表示Cre表达框是杂合子状态,+号是指另外一个基因座还是正常表达内源基因的。 所以,ikbkb Xcrl应该是指Ikbkb在表达Xcrl的细胞中被敲除的小鼠。 Cre/LoxP重组酶系统包含两个部分:Cre重组酶及其特异识别的LoxP位点。 Cre重组酶(Cyclization Recombination Enzyme)由大肠杆菌噬菌体P1的Cre基因编码,是由343个氨基酸组成的38kD的蛋白质。 它不仅具有催化活性,而且与限制酶相似,能够特异性识别loxP位点。 功能:loxP位点是Cre酶的作用位点,本身不改变基因功能。 应用:与Cre小鼠交配后,Cre酶可删除或修饰两侧有loxP位点的基因。 二、工作原理 1. 867. Cre-loxP系统的基本原理 ① Cre酶:由噬菌体P1衍生的一种重组酶,能够识别并切割特定的DNA序列——loxP位点。 Cre 酶是一种来自噬菌体 P1 的重组酶,能特异性识别并剪切 loxP 位点(一段特定的 DNA 序列)。 当 Cre+ 个体与携带 loxP 修饰基因(如 floxed gene,即两端带有 loxP 位点的基因)的个体交配时,Cre 酶会切除 loxP 位点之间的 DNA 片段,导致基因敲除(knockout)或激活 Cre/LoxP重组酶系统包含两个部分:Cre重组酶及其特异识别的LoxP位点。 Cre重组酶(Cyclization Recombination Enzyme)由大肠杆菌噬菌体P1的Cre基因编码,是由343个氨基酸组成的38kD的蛋白质。它不仅具有催化活性,而且与限制酶相似,能够特异性识别loxP位点。 LoxP(locus of X-overP1)位点长为34bp,包括两个13bp的 Cre重组酶是一种DNA重组酶,能够催化DNA分子上的重组事件,特别是在LoxP序列的两个LoxP位点之间引发基因组的重组。 通过将Cre重组酶与AAV结合,可以实现对目标细胞内基因的特异性编辑和调控,从而实现基因功能研究和疾病模型的建立。 01、更强的区域特异性 Cre-LoxP系统简介 Cre-LoxP系统策略是进行基因组定点突变的新途径,可在DNA的特定位点上执行敲除、插入、激活、倒转及易位等。 该系统在80年代被引入后,已被成功的应用于酵母菌、植物、哺乳动物细胞培养及小鼠身上。 Cre-LoxP系统简介 Cre-LoxP系统策略是进行基因组定点突变的新途径,可在DNA的特定位点上执行敲除、插入、激活、倒转及易位等。 该系统在80年代被引入后,已被成功的应用于酵母菌、植物、哺乳动物细胞培养及小鼠身上。 Cre-LoxP系统机制(Gao, Jing et al. 功能:loxP位点是Cre酶的作用位点,本身不改变基因功能。 应用:与Cre小鼠交配后,Cre酶可删除或修饰两侧有loxP位点的基因。 二、工作原理 1.
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